大肠埃希杆菌性胃肠炎应该做哪些检查(3)

b、乳鼠灌胃试验:将被检菌株接种于Honda产毒肉汤内,于36℃培养24h,3000r/min离心30min,取上清液经薄膜滤器过滤,60℃加热30min,每毫升滤液内加入2%伊文思蓝溶液0.02ml,将此滤液用塑料小管注入1~4天龄的乳鼠胃内0.1ml,同时接种3~4只,禁食3~4h后用氯仿麻醉,取出全部肠管,称量肠管(包括积液)重量及剩余的体重,肠管重量与剩余体重之比大于0.09为阳性,0.07~0.09为可疑。

c、家兔结扎回肠段试验:将被检菌株接种于Honda产毒肉汤,于36℃培养24h,3000r/min离心30min,取上清液经薄膜滤器过滤,滤液分成两份,一份不加热,供测LT用;另一份60℃加热30min,供测ST用,取体重2kg家兔,禁食1天,麻醉后剖腹,取出回肠段,按10~15cm为一段,分段结扎,取一段注射肉汤2ml作为阴性对照,另一段注射已知产毒菌肉汤培养物的滤液2ml作为阳性对照,其他各段分别注射待试菌株肉汤培养物的滤液2ml,将腹壁缝合,测定ST时,于注射后6~8h剖腹检查;测定LT时,于注射后18h剖腹检查,抽取各肠段内的滤液,测定其容量,并测定肠段的长度,积液量(ml)与肠段长度(cm)之比大于1为阳性。

d、血清学试验:肠毒素试验阳性菌株可用ETEC有关的多价O血清及单价血清作玻片凝集试验,以确定其O抗原。

(4)侵袭性大肠埃希杆菌:

A、生化试验:于鉴别平板上挑取菌落3~5个,一般应多挑取与志贺菌相似的不发酵乳糖的菌落,但发酵乳糖的优势菌落亦可适当挑取,将挑取的菌落接种半固体管,36℃培养18~24h,有动力的菌株一般可以弃去,除非经血清学鉴定为0124,留下无动力的菌株,接种三糖铁琼脂,悬挂靛基质试纸片,36℃培养18~20h,同时并作赖氨酸脱羧酶试验,EIEC的典型生化特性为:乳糖,蔗糖不产酸或产酸,葡萄糖产酸,产气或不产气,H2S阴性,靛基质阳性,赖氨酸脱羧酶阴性,除O124外均无动力,赖氨酸脱羧酸试验亦可以放在血清学试验以后做。

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