G-6-PD缺乏症的一般实验室检查与其他溶血性贫血相比较无特异性，其诊断有赖于红细胞G-6-PD酶活性的测定，G-6-PD缺乏症的筛选实验和酶活性定量测定方法有如下几种。
1、高铁血红蛋白还原试验（methemoglobinreductiontest）：速度比正常人显著减慢，该法是目前国内常用于筛查G-6-PD活性试验之一，微量组织化学洗脱法适合于杂合子的检测，其可信度为75％，此法的缺点是如果存在HbH，不稳定血红蛋白、高脂血症、巨球蛋白血症等均造成假阳性结果。
2、抗坏血酸（维生素C）氰化物试验（ascorbate-cyanidetest）：如果G-6-PD缺乏，H202破坏血红蛋白，形成一个棕色斑点。
3、硝基四氮唑蓝试验：该试验可用来检测NADPH生成量。
4、荧光点试验（fluorescentspottest）：该试验是最简单，最可信和最敏感的过筛试验。
5、G-6-PD活性测定：通过单位时间生成NADPH的量来反映红细胞G-6-PD活性，其常用方法有世界卫生组织（WHO）推荐的ZinkJam法和国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐的Glock与Mclean法，在检测红细胞G-6-PD活性时，应注意试验时患者的临床状况，在溶血发作期，老化的酶缺乏红细胞在外周血中被选择性地清除掉，年轻红细胞因酶水平较高得以保护，用这些细胞来进行试验分析不能真实地反映红细胞的G-6-PD活性。为了解决这一问题，可以于急性溶血2～4个月后复查外，或用离心沉淀技术剔除年轻红细胞后再检测红细胞G-6-PD活性，但试验系统中用沉淀红细胞是不标准的，如果在溶血发作期间接受了红细胞输注亦会影响G-6-PD活性测定结果。
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