单纯疱疹病毒肺炎应该做哪些检查(2)

3、DNA探针技术的应用:DNA探针有助于HSV感染的诊断,DNA探针在细胞形态学可疑时能确定诊断,几种因素能混淆形态学诊断:

①HSV包涵体与巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)和腺病毒(adenovirus)的包涵体相似;②发生HSV和CMV双重感染时;③除了HSV其他呼吸道病毒也能产生多核细胞,原位杂交使特殊病毒基因组序列定位,它比传统的确定方法简单快速。

4、聚合酶链反应技术(PCR):PCR对HSV病毒感染可提供结论性依据,即使在石蜡包埋组织只要有一致的病毒病理改变即可,每次检查必须有阴性对照组织,尽管存在隐性感染的可能性,但对没有病毒病理改变的对照组织,PCR检查HSV仍为阴性,如进行合适的对照,该方法快速(1天内完成),准确特异,敏感性高,能对陈旧或复杂的标本进行处理,PCR和HSV培养结果近似,PCR没有Tzanck涂片和病毒培养的许多技术和实际限制,PCR在快速诊断可疑HSV病毒感染的免疫抑制病人显示其优越性。

三、血清学检查

该方法的最大价值是证明病人已经感染过HSV,血循环中的抗HSV抗体是存在反复感染可能的标志,抗体滴度增加4倍或更多提示HSV的近期感染,HSV抗体可通过许多方法检测,包括补体结合试验,微量中和试验和酶免疫分析法,这些方法高度敏感和可靠,但血清学检查不能区分内源性病毒感染和重新感染,血清学检查结果无诊断意义,无助于快速诊断,另一问题为HSV-1和HSV的交叉反应,故不能确定HSV急性感染的血清分型,仅仅在急性期血清中无HSV抗体时,血清学检查可用于诊断HSV初次感染,在这种情况下,如果恢复期血清中抗体出现,可称为血清转阳现象(seroconversion),HSV肺炎时抗体滴度不增高常提示预后较差,病毒容易广泛播散。

四、病毒分型

常用3种方法为单纯疱疹病毒分型,首先采用和标准的方法为限制性内切核酸酶切割,并经琼脂凝胶电泳分离,HSV-1和HSV-2的DNA类型不同,据此很容易鉴别HSV-1和HSV-2,第2种方法为用荧光素标记的特异性单克隆抗体进行病毒的分型,该方法具有对切片和培养基进行快速和直接检测的优点,第3种方法为使用溴乙烯去氧苷,该物质在细胞培养基保持适当浓度仅可阻滞HSV-1复制,HSV血清分型对于流行病学很重要,临床医生很少需要这种信息,HSV生殖道感染和HSV脑炎例外。

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