1、血清CPK
SMA-Ⅰ型血清CPK均为正常，Ⅱ型偶见增高，其CPK同工酶MB常有升高，Ⅲ型CPK水平常增高，有时可达到正常值10倍以上，且同工酶变化以MM为主；一般CPK常随着肌肉损害的发展而增加，至晚期肌肉严重萎缩时，CPK水平才开始下降。
2、基因诊断
对于儿童型SMA，一般可通过PCR方法扩增SMNt基因的7，8号外显子并结合单链构象多态分析(SSCP)或应用：DraI，DdeI作SMNt基因7，8号外显子酶切图谱分析进行诊断。
3、CT肌肉扫描
此有助于SMA与各型肌营养不良的鉴别，SMA呈现不完整轮廓的弥散性低密度改变，肌组织反射丧失；而肌营养不良则表现大量低密度损害，全部肌肉均受累，一般假性肥大在SMA患者中很少见。
4、电生理检查
EMG可反映4种主要类型SMA的严重程度和进展情况，但其异常改变相似，包括纤颤电位和复合运动单位动作电位(MUAPs)的波幅和时限增加以及干扰相减少，在SMA-Ⅲ，Ⅳ型病例中，有时可见神经源性和肌源性电位，混杂存在于同一肌肉，在CPK水平增高者肌源性MUAPs可更明显，某些SMA-Ⅲ型病例，肌活检呈神经源性损害，而EMG却表现肌源性损害，提示EMG与临床特征可不一致，各型SMA均见纤颤电位及正锐波，但在SMA-Ⅰ型更明显，见于所有患者，而SMA-Ⅲ型仅见60％，束颤电位在SMA-Ⅰ型约20％阳性，而Ⅲ型则有50％阳性，SMA-Ⅰ型的一个独特表现，即在肢体放松时，可见到5～15Hz的MUAPs自发性发放，随意运动时，各型SMA均见干扰相减少，尤其在SMA-Ⅰ型，仅呈单纯相，这是运动单位丧失的证据，在SMA-Ⅲ，Ⅳ型的较晚期病例，可见到类似于肌源性损害的低波幅多相电位，这与肌活检提示的继发性肌源性改变相符。
5、病理检查
肌肉活检对确诊SMA具有重要意义，其病理表现特征是具有失神经和神经再支配现象，各型SMA亦有不同的肌肉病理特点。
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