弓形体感染的诊断主要根据典型的眼部及全身临床表现，病原体直接观察，特异性抗体检测和聚合酶链反应等检查。
一、病原学检查
1、涂片染色法：在疾病的急性期，血液，脑脊液，尿和乳汁中均可有滋养体存在，将这些标本离心，沉淀物作涂片，可通过姬氏染色在显微镜下观察，慢性期可通过活组织检查，于苏木精-伊红染色或银染色后进行观察。
2、动物接种分离或细胞培养：取患者的样本接种于敏感的动物腹腔内，一周后取腹腔液在显微镜下进行检查，或接种于离体培养的单层有核细胞后进行观察。
二、血清学方法：在多数情况下，弓形体病原学检查比较困难，且阳性率不高，因此，多借助于血清学检查，但是单纯的血清学方法不能确定诊断，特别是对怀疑眼弓形体病的患者，血清抗弓形体抗体检测仅能作为诊断参考，更为重要的是应进行眼内液弓形体抗体的检测。
常用的血清学检查方法有Sabin-Feldman染料试验，补体结合试验，血细胞凝集反应，免疫荧光素标记抗体试验，酶联免疫吸附试验，免疫印迹试验和免疫吸附凝集试验。
1、Sabin-Feldman染料试验：此是检测抗弓形体抗体的准确试验方法，其他检测方法往往以此方法作为校正标准，其原理为将患者的血清或其他体液与补体和活的弓形体一起培养，加入染料以定量抗体，此试验可以检测到早期的感染，对急性期和慢性期感染均有良好的敏感性和特异性，但由于此种方法使用活的有毒力的弓形体，鉴于安全考虑，许多实验室已不用此种检测方法。
2、补体结合试验：在循环抗体有较高水平时，补体结合试验有较高的敏感性，并对观察抗体水平的升高有帮助，主要用于获得性弓形体感染的诊断，但在感染的早期和慢性期，此种试验的诊断价值有限，因此此种检测方法应与其他方法联合应用。